打印當前頁Cell-Tracker Green CMFDA 活細胞示蹤探針（綠色）
重要提醒（購買或初次使用前）請務必查閱：
一、熒光染料（粉末形式，特別是對氧敏感探針）配制儲存液的注意事項 |
1）熒光探針在固體（粉末）狀態很穩定，按照說明書要求溫度來保存，效期內使用即可。 2）熒光探針用有機溶劑比如：DMSO，溶解配制成儲存液之后，一般來說，放到-20℃保存（2-3個月內使用，甚至更短，具體可咨詢）；放到-80℃保存（6個月內使用，具體可咨詢）。前提是，使用的有機溶劑必須是高質量且無水的，特別是DMSO，必須是新鮮開封。 3）配制的儲存液請務用密封性好且螺旋蓋的低容量凍存管保存（不可用EP管），至少按照5-10ul/管來分裝，避光凍存。 4）對于某些特殊化合物（對空氣敏感或存在不穩定結構），可能保存周期特別短，甚至只能當天使用。這些化合物說明書上會有說明。
有更多信息，請聯系我司工作人員來核實。 |
二、熒光染料（以溶于有機溶劑的儲存液形式提供）的注意事項 |
1） 以溶于有機溶劑的儲存液形式的熒光探針相對來說是比較穩定的化合物；但收到這類產品，也需用戶根據單次用量（5-10ul/管來分裝），-20℃以下密封避光保存，減少反復凍融次數。 2） 請務用密封性好且螺旋蓋的低容量凍存管保存（不可用EP管）。務必避光。
有更多信息，請聯系我司工作人員來核實。 |
產品關鍵詞：
Cell-Tracker Green CMFDA；Cell-Tracker Red CMTPX；Cell movement 細胞運動；Cell location 細胞定位；Cell Tracker dye 細胞示蹤探針；CAS NO：136832-63-8；
訂購信息：
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） |
| Cell-Tracker Green CMFDA 活細胞示蹤探針（綠色） | MX4107-50UG | 50ug | 625 |
Cell-Tracker Green CMFDA 活細胞示蹤探針（綠色） | MX4107-100UG | 2×50μg | 995 |
Cell-Tracker Green CMFDA 活細胞示蹤探針（綠色） | MX4107-250UG | 5×50μg | 2455 |
Cell-Tracker Green CMFDA 活細胞示蹤探針（綠色） | MX4107-1MG | 1mg | 3535 |
產品描述
Cell-Tracker熒光探針是用來監測細胞運動、定位、增殖、遷移、趨化和侵襲的優秀工具。
Cell-Tracker Green CMFDA，英文全名：5-chloromethylfluorescein diacetate，能自由穿透細胞膜進入細胞，在胞內轉化生成不具細胞膜滲透性的反應產物。該產物幾次傳代都能良好的保留在活細胞。在細胞群內，染料只會轉移到子代細胞，不會轉移到鄰近細胞。
Cell-Tracker Red CMTPX特地設計使其至少72h（典型有3~6代）能展示熒光，此染料表現出理想的示蹤特征：穩定、工作濃度下無毒性、良好保留在細胞，且在生理pH下呈明亮熒光。另外，Cell-Tracker Red CMTPX的激發和發射光譜（492/517nm）與紅色熒光蛋白RFP很好的分開，適用于多重標記（見附表1. Cell-Tracker熒光探針的光譜特征）。
產品特性
1） CAS NO.：136832-63-8
2） 同義名：CellTracker™ Green CMFDA; Spiro(isobenzofuran-1(3H),9'-(9H)xanthen)-3-one, 3',6'-bis(acetyloxy)-5-(chloromethyl)-;
3） 分子式：C25H17ClO7
4） 分子量：464.86 g/mol
5） 外觀：無色固體
6） 溶解性：溶于DMSO
7） 化學結構式： 
保存與運輸方法
保存：-20℃避光干燥保存，至少2年有效。
運輸：冰袋運輸。
注意事項
熒光染料都存在淬滅的問題，保存和操作過程中注意避光。
避免使用含氨基和巰基的緩沖液。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
應用示例
文獻1）Nasir NAM et al.Fluorescent cell tracer dye permits real‐time assessment of re‐epithelialization in a serum‐free ex vivo human skin wound assay. Wound Repair Regen. 2019 Jan;27(1):126-133.
Method (Cell tracker dye uptake within human ex vivo wounds in situ)：Four microliters of 25 μM CMFDA (or CMTPX) was added to the wound surface for 30 minutes, then washed dropwise with phosphate buffered saline.For cell viability studies, 1 μg/mL of propidium iodide (PI) was cotreated alongside CMFDA. Planimetric imaging was conducted using a Leica M205 FA upright Stereomicroscope using a 5x/0.50 pLANapo LWD objective at the equivalent of 64x magnification and captured using a DFC 565FX camera through LAS AF v3.1.0.8587 software. Specific band‐pass filter set for green fluorescent protein was used.
Fig. Epithelial repair of human ex vivo wounds progresses via an extending shield mechanism. Human ex vivo wounds were cultured in the presence of the fluorescent dyes. CMFDA and PI cotreatment at time of injury (D0) identifies live (CMFDA; green) and dead (PI; red) cells around the injury site (A), and these wounds traced to day 1 indicate PI‐labeled cells are no longer present (B).
文獻2）Frazer J. Bye et al. Development of bilayer and trilayer nanofibrous/microfibrous scaffolds for regenerative medicine.Biomater. Sci., 2013, 1, 942-951.
Method (Cell migration into scaffolds at 7 days)：CellTracker red (CMTPX) or green (CMFDA) were applied to the hESMPs and fibroblasts respectively, prior to seeding. Cells were washed 3 times with 5 ml PBS then 10 ml of serum free cell-appropriate medium containing CellTracker (10 mM) was added and the cells incubated for 45 minutes at 37 °C. After incubation, the cells were washed 3 times with 5 ml PBS following which they were seeded onto scaffolds.Scaffolds could then be imaged in an Axon ImageExpress microscope (Molecular Devices, Sunnyvale, USA) at 570 nm λex–620 nm λem (CellTracker red) and 480 nm λex–533 nm λem (CellTracker green).
Fig. Co-culture of CellTracker™ labelled fibroblasts (green) and hESMPs (red) on bilayer membranes of either PHBV–PLA or PHBV–PCL. hESMPs were seeded on day 1 (red) onto the PHBV face of each bilayer. Fibroblasts were seeded on either the PLA or PCL face of the bilayer on day 2 (green) and then cultured for a further 7 days. In A fibroblasts (green) are confined to the PLA face after 7 days with no sign of hESMPs (red). On the opposite face (B, PHBV), hESMPs (red) are also present once again with no fibroblasts.
使用方法
1．細胞準備
在合適的培養基內培養細胞。貼壁細胞可以在含蓋玻片的培養皿內爬片生長，裝入足量的生長培養基。
2．操作步驟
以下描述的是將染料加到培養細胞以及在熒光顯微鏡下成像的步驟。各種因素，比如將染料加載到細胞或組織，可能都需根據特定的細胞類型對某些條件做出修改。
探針的染色濃度需根據用途來調整。建議剛開展實驗需要測定至少1個10倍范圍內的濃度。一般來說，長期染色（≥3天）或使用快速分裂的細胞需5-25µM的染料。對于短期實驗（比如活力測定），使用低濃度染料（0.5-5µM）。為了維持正常的細胞形態和降低潛在的偽影，盡可能使用低濃度的染料。
2.1制備Cell-Tracker染色工作液
①開瓶前將產品從冰箱取出，放到室溫使其回溫至少20min。
②用高質量的無水DMSO溶解粉末使其濃度為10mM。例如，對1mgCell-Tracker Green CMFDA（Mw:464.86g/mol）凍干粉，加入215µlDMSO充分溶解，即得到10mM母液。
③ 用無血清培養基稀釋母液到0.5-25µM的工作濃度。預熱染色工作液到37℃。
2.2懸浮細胞染色步驟
① 離心收集細胞，吸掉上清液。用預熱的Cell-Tracker染色工作液輕輕的重懸細胞。
② 在適合特定細胞類型的生長條件下孵育15-45min。
③ 離心細胞，吸掉Cell-Tracker染色工作液。
④ 加入選擇的培養基，將標記好的細胞分配到載玻片或到選擇的培養器皿內。
⑤根據附表1選擇合適激發和發射波長的濾片來進行成像檢測。
2.3貼壁細胞染色步驟
① 吸走培養基。
② 輕輕加入預熱的Cell-Tracker染色工作液。
③ 在適合特定細胞類型的生長條件下孵育15-45min。
④吸掉Cell-Tracker染色工作液。
⑤ 加入選擇的培養基。
⑥根據表1選擇合適激發和發射波長的濾片來進行成像檢測。
3．熒光顯微鏡觀察
Cell-Tracker熒光探針可用帶標準光學和圖像增強的各種落射熒光光學顯微鏡檢測。根據染料選擇合適的濾片。見附表1 Cell-Tracker熒光探針的光譜特征。
相關產品
貨號 | 名稱 | 規格 |
MX4107-1MG | Cell-Tracker Green CMFDA 活細胞示蹤探針（綠色） | 1mg |
MX4108-100UG | Cell-Tracker Orange CMTMR 活細胞示蹤探針（橙色） | 2×50μg |
MX4109-100UG | Cell-Tracker Red CMTPX 活細胞示蹤探針（紅色） | 2×50μg |
MX4101-1G | Fluorescein diacetate (FDA) 二乙酸熒光素 | 1g |
MX4205-10MG | Propidium Iodide 碘化丙啶（粉末） | 10mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供良好產品。